Recherche des composés à activités biologiques à partir des graines vertes de Coffea canephora et Coffea arabica

Abstract

ملخص يركز هذا العمل على دراسة المكونات الكيمونباتية و الأنشطة البيولوجية للمستخلصات المختلفة المستخرجة من البذور الخضراء ل Coffea canephora و Coffea arabica. تم إجراء تحليل التركيب الكيميائي لمستخلصات البذور الخضراء لنبتة C. canephora و C. arabica باستخدام الفصل الكروماتوجرافي عالي الاستبانة مع وسم البنية الكيميائية بأسلوب التصوير بالرنين المغناطيسي وبالأشعة تحت الحمراء .تم تقييم نشاط مضادات الأكسدة بطرق تعتمد على نقل ذرة الهيدروجين و/او نقل الإلكترون الفردي .كما تم تقدير النشط المثبط لإنزيم الكولين استيراز بواسطة إنزيمين أسيتيل كولين استيراز (AChE )وبيتيريل كولي انستيراز (BChE .)تم تقييم النشاط المضاد للميكروبات للمستخلصات ضد السلالات البكتيرية والفطرية المختلفة من خلال تحديد الحد الأدنى للتركيز المثبط .كما تم اختبار تأثير عدم الالتصاق في الوقت صفر وبعد المعالجة المسبقة للبوليسترين مع جميع المستخلصات ضد ثلاث سلالات بكتيرية مرجعية .في الوقت نفسه، تم تحديد اختبار انحلال الدم للمستخلصات المختلفة ضد خلايا الدم الحمراء. أظهر التحليل الكروماتوغرافي عن وجود أحماض الفينول وحمض الهيدروكسيناميك والفلافونويد .كما سمح لنا التوصيف بواسطة الرنين المغناطيسي النووي والأشعة تحت الحمراء بتوضيح بنية Kahweol acétate و Caféine .تبين أن قدرة مضادات الأكسدة لمستخلص n- بيوتانول من البذور الخضراء لـ C. canephora و C. arabica عم اًدج ةيلاع =IC50ABTS 0,08 ± 3,96 ميكروغرام /مل و ,285 ±910, ميكروغرام /مل على التوال ومع = A0.5CUPRAC 0,36 ± 4,09 و 1,17 ± 0,49 ميكروغرام /مل .بالإضافة إلى ذلك، أظهرت جميع مستخلصات C. arabica و C. canephora هاجت اًطبثم اًريثأتBChE والذي وصل إلى 04 و ٪91٪ على التوالي .أظهرت نتائج النشاط المضاد للميكروبات أن المستخلص الميثانولي و n- بيوتانول من C. canephora أظهرا قوة كبيرة مضادة للجراثيم ضد Staphylococcus aureus ATCC 25923 بتركيز يساوي 04 ميكروغرام / مل . بينما اظهر مستخلص n- بيوتانول من C. arabica نجاعته بتركيز أدنى مثبط يساوي ,0291 ميكروغرام / مل ضد Citrobacter freundii ATCC 8090 ، Staphylococcus aureus ATCC 25923. أظهر اختبار مقاومة الالتصاق أن جميع المستخلصات، باستثناء مستخلص أسيتات الإيثيل من C. canephora، دض قاصتللال اًداضم اًديج اًريثأت رهظتStaphylococcus aureus ATCC 25923 مع نسبة تثبيط التي تصل إلى 40 و ٪54٪ على التوالي .أخي ، ةيرشبلا ءارمحلا مدلا ايلاخ دض ةماس تسيل تاصلختسملا عيمج نأ مدلا للاحنا تارابتخا ترهظأ ،اًرباستثناء المستخلص المتبقي من C. canephora و مستخلص أسيتات الإيثيل من C. arabica. الكلمات المفتاحية: C. arabica ،C. canephora، الفصل الكروماتوغرافي عالي الإستبانة، التصوير بالرنين المغناطيسي، الأشعة تحت الحمراء، النشاط المضاد للأكسدة، التركيز الأدنى المثبط، البيتيريل كولين إستيراز، أسيتيل كولين استيراز. Résumé Ce travail se focalise sur l’étude in-vitro des activités biologiques des différents extraits à partir des graines vertes de Coffea canephora et Coffea arabica. L’analyse de la composition chimique des extraits des graines vertes de C. canephora et C. arabica a été effectuée à l’aide d’une chromatographie liquide à haute performance RP-HPLC-PDA, RMN 1H, 13C, 2D et l’infrarouge. L’activité antioxydante a été évaluée par des méthodes basées sur le transfert d’atome d’hydrogène et le transfert d’électron singulier. Alors que, l’inhibition du cholinestérase a été estimée par deux enzymes l’acétylcholinestérase (AChE) et la butyrylcholinestérase (BChE). L’évaluation de l’activité antimicrobienne des extraits vis-à-vis des différentes souches bactériennes et fongiques a été effectuée par la détermination de la concentration minimale inhibitrice (CMI). L'effet antiadhésif au temps zéro et après prétraitement du polystyrène par de l’ensemble des extraits a été testé contre trois souches bactériennes de références. En parallèle, le test d’hémolyse des différents extraits a été déterminé vis-à-vis des globules rouges. L’analyse chromatographique a mis en évidence la présence des acides phénoliques, des acides hydroxycinnamiques et des flavonoïdes. Ce pendant, la caractérisation par RMN et l’infrarouge nous ont permis d’élucider la structure de la Kahweol acétate et de la Caféine. Le potentiel antioxydant de l’extrait n-butanolique des graines vertes de C. canephora et C. arabica s’est montré très important avec des CI50ABTS= 3,96±0,08 μg/mL et 5,28±0,19 μg/mL respectivement et avec une A0,5CUPRAC= 4,09 ± 0,36 et 1,17 ± 0,49 μg/mL. De plus, tous les extraits de C. arabica et C. canephora ont révélé un effet inhibiteur vis-à-vis de la BChE qui atteint 40% et 13% respectivement. Les résultats de l’activité antimicrobienne a montré que l’extrait méthanolique et n-butanol de C. canephora présentent un pouvoir antibactérien important contre Staphylococcus aureus ATCC 25923 avec une CMI de 40 μg/ mL. Alors que l’extrait n-butanol de C. arabica présente une bonne CMI vis-à-vis de Citrobacter freundii ATCC 8090, Staphylococcus aureus ATCC 25923 (13,02 μg/mL). Le test d’antiadhésion a montré que l’ensemble des extraits mis à part l’extrait d’acétate d’éthyle de C. canephora présentent un bon effet antiadhésif vis-à-vis de Staphylococcus aureus ATCC 25923 avec un pourcentage d’inhibition qui atteint 74% et 57% respectivement. Enfin les tests d’hémolyse ont montré que l’ensemble des extraits ne sont pas toxique vis-à-vis des globules rouges humains, à l’exception de la phase résiduelle de C. canephora et celui d’acétate d’éthyle de C. arabica. Mots clés: C. caneph