Caractérisation de la flore aérobie sporulée mésophile inféodée à la poudre de lait importée et commercialisée en Algérie.

Abstract

خ ص تعتبر الجزائر ثاني أكبر مستورد لمسحوق الحليب في العالم حيث تعتمد صناعة الألبان بها بشكل أساسي على المواد الخام المستوردة خاصة مسحوق الحليب. بالمقابل نجد أن بودرة الحليب هذه اضافة الى بقية منتجات الألبان المجففة قابلة للتلوث و بشكل متكرر بالبكتيريا الهوائية التي تشكل أبواغ وعلى رأسها جنس Bacillus . تقاوم هذه الأبواغ درجات حرارة المعالجة العالية وتلتصق بأسطح الفولاذ المقاوم للصدأ ، حيث تنمو وتتكاثر عند توفر الظروف الملائمة وتقوم بتشكيل الأغشية الحيوية. بمجرد تشكل غشاء حيوي ناضج تنفصل الأبواغ وتقوم مع الخلايا النباتية بتلويث المنتج السائل المتدفق عليها. وهكذا فان Bacillus spp. قد يسبب التلف و / أو التسمم الغذائي بسبب طبيعته السامة والممرضة ، والإنزيمات التي يقوم بإنتاجها وطرحها خارج الخلية. كنتيجة يتم إهدار كمية كبيرة من الحليب ومنتجات الألبان كل عام. في الجزائر قلة الجودة الملاحظة في الحليب المبسترالمعاد تشكيله خيرمثال على ذلك. على خلاف المعلوم يتخثر هذا المنتج بعد يومين أو حتى في نفس اليوم. في هذا السياق، تم إجراء توصيف خواص الأبواغ الهوائة المتكاثرة في درجة الحرارة المتوسطة في مسحوق الحليب المستورد المسوق في الجزائر. تم جمع 21 عينة من مسحوق الحليب من 10 أصول مختلفة. تم إجراء تحليل لعزل مسحوق الحليب على أساس التسلسل RAPD-M13 و S rRNA 16 . تميزت مجموعات تطور السلالات بتسلسل الجين panC . كما تم إجراء تقييم للنشاط الإنزيمي والمقاومة الحرارية للعزل التمثيلي. كشف التحليل الجزيئي عن 17 مجموعة. كانت مجموعات Bacillus cereus المجموعات الثانية والثالثة والرابعة هي المجموعات الجينية الرئيسية. أثبتت النتائج أيضا تواجد Bacillus cereus في جميع المساحيق التي تم تحليلها كما أظهرت مجموعات Bacillu cereus و Bacillus subtilis نشاط تحلل بروتيني مرتفع بالإضافة إلى قيم D95 ° C تتراوح من 1 إلى 9 دقائق وقيم z بين 6.5 و 18.6 درجة مئوية. الكلمات المفتاحية: مسحوق الحليب، الجزائر،العصيات،الأبواغ، المقاومة الحرارية، النشاط الإنزيمي. iv Résumé L'Algérie est le deuxième plus grand importateur de lait en poudre dans le monde. Son industrie laitière fonctionne principalement sur la base de matières premières importées, principalement la poudre de lait. Cependant, la poudre de lait et les produits laitiers déshydratés sont connus pour être fréquemment contaminés par des bactéries aérobies sporulées principalement du genre Bacillus. Ces spores résistent à des températures de traitement élevées et adhèrent aux surfaces en acier inoxydable, où elles germent dans des conditions de croissance favorables et forment des biofilms. En raison du potentiel de bio-transfert d'un biofilm mature, les spores et les cellules végétatives se détachent et contaminent le produit liquide qui s'écoule dessus. Ainsi, Bacillus spp. peut provoquer une altération et/ou une intoxication alimentaire en raison de sa nature toxinogène et pathogène, et des enzymes extracellulaires. En conséquence, une grande quantité de lait et de produits laitiers est gaspillée chaque année. La qualité précaire du lait pasteurisé en Algérie en est une illustration. Ce produit coagule après deux jours ou même dans la même journée. Dans ce contexte, une caractérisation de la flore aérobie mésophile inféodée à la poudre de lait importée commercialisé en Algérie a été réalisée. Pour cela, 21 échantillons de poudre de lait provenant de 10 origines différentes ont été collecté. Une analyse des isolats de poudres de lait basée sur le séquençage RAPD-M13 et 16SrRNA a été effecuée. Les groupes phylogénétiques ont été distingués par le séquençage du gène panC. Une évaluation de l'activité enzymatique et de la thermorésistance des isolats représentatifs a également été effectuée. L'analyse moléculaire a révélé 17 groupes. Les groupes II, III et IV de Bacillus cereus étaient les principaux groupes phylogénétiques. Bacillus cereus été présente dans la totalité des poudres analysées. Les groupes Bacillu cereus et Bacillus subtilis ont démontré une activité protéolytique élevée ainsi que des valeurs D95 °C allant de 1 à 9 minutes et des valeurs z entre 6,5 et 18,6 °C. Mots clés : Poudre de lait, Algérie, Bacillus, Spores Aérobies Mésophiles, Thermorésistance, Activité enzymatique. v Abstract Algeria is the second largest importer of milk powder in the world. Its dairy industry operates mainly based on imported raw material, namely milk powder. However, milk powder and dehydrated milk products are known to be frequently contaminated by spore-forming aerobic bacteria, mainly of the genus Bacillus. These spores are resistant to high processing temperatures and adhere to stainless steel surfaces, where they germinate under favourable growth conditions and form biofilms. Due to the bio-transfer potential of a mature biofilm, the spores and vegetative cells detach and contaminate the liquid product flowing over it. Thus, Bacillus spp. can cause food spoilage and/or intoxication due to its toxinogenic and pathogenic nature and extracellular enzymes. As a result, a large amount of milk and dairy products is wasted each year. The precarious quality of pasteurized milk in Algeria is an illustration of this. This product coagulates after two days or even within the same day. In this context, a characterization of the mesophilic aerobic flora inferred in the imported milk powder marketed in Algeria was carried out. For this purpose, 21 samples of milk powder from 10 different origins were collected. An analysis of milk powder isolates based on RAPD-M13 and 16S rRNA sequencing was performed. Phylogenetic groups were distinguished by the sequencing of the panC gene. An evaluation of the enzymatic activity and heat resistance of representative isolates was also performed. Molecular analysis revealed 17 groups. Bacillus cereus groups II, III and IV were the main phylogenetic groups. Bacillus cereus was present in all powders analysed. The Bacillus cereus and Bacillus subtilis groups demonstrated high proteolytic activity with D 95°C values ranging from 1 to 9 min and z-values between 6.5 and 18.6°C. Keywords: Milk powder, Algeria, Bacillus, Aerobic Mesophilic Spores, Thermoresistance, Enzymatic activity.